细胞增殖和毒性检测服务

使用说明书

仅供体外研究使用,不用于临床诊断!

第1版(2016年04月修订)


方法
原理
适用范围
优点
缺点
MTT
活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。
广泛用于一些生物活性因子的活性检测、细胞增殖测定、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等
灵敏度高、价格经济实惠
MTT经还原所产生的甲瓒产物不溶于水,需被溶解后才能检测。这不仅使检测时的工作量增加,也会对实验结果的准确性产生影响,而且溶解甲瓒的有机溶剂有毒性。
CCK-8
WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。
广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等
1、使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂; 2、能快速检测; 3、灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度; 4、重复性优于MTT法; 5、对细胞毒性小; 6、检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。 
1、价格比较贵。 2、CCK-8试剂的颜色为淡红色,与含酚红的培养基颜色接近,不注意的话容易产生漏加或多加。


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